ImageJ高效分析血管网络
血管形成实验(Tube formation assay)是体外研究血管生成的经典方法,其优点是可快速确定参与血管生成的基因或通路。

打开Angiogenesis Analyzer宏,其分析界面如下:

分析步骤
1. ImageJ软件File -> Open打开示例图片:

2. 点击Network analysis分析界面,Angiogenesis Analyzer插件可以分析小管形成明场图片(Phase Contrast)或荧光图片(Fluo):

稍等片刻快速得到分析结果:

3. File -> Save as…即可保存结果到Excel表格:

血管形成实验量化指标有number of tubes; number of loops/meshes; number of branch sites/nodes; length of tubes等,SCI论文中常用的分析指标是branch points与capillary length。
扩展
1、VesselJ插件分析血管密度
VesselJ是一种基于动态阈值算法的新型ImageJ插件,用于分析血管网络的优点是排除了人为选择阈值带来的误差,还可以同时自动处理多个图像。安装方法:插件放置Plugins文件夹下,重启ImageJ软件即可。Plugins -> VesselJ处可见。
步骤:
(1)File -> Open打开PECAM1染色(Red)血管,Plugins -> VesselJ,选择CD31-red,点击OK弹出提示框只能仅打开需要分析的图片:


提示框点击OK后弹出Selection required,矩形选框选择荧光图片背景,点击OK:

分析完成,得到分析结果:

结果解读:总面积(Total_pixels)是78608,非血管的面积(Not_NV)是42150,血管的面积(NV)是36458,血管占总面积的比例是0.464,即血管密度为46.4%。
(2)批量分析血管密度
ImageJ软件File -> Open打开多张血管图片,分析步骤与分析单张图片大体相同,不同的是需要在多张图片上矩形选框选择荧光图片背景,即可快速得到结果。
2、ImageJ Ridge Detection插件分析网络结构
下载ij_ridge_detect-1.4.0.jar插件后将文件置于plugins文件夹下,重启软件即可。具体使用方法再往期已经分享过,
AngioTool是一款能够进行全面血管网络分析的实用免费工具。


AngioTool可以得到的诸多结果及解释:

今天给大家分享高效使用ImageJ分析图片就到此为止了,感兴趣的同学可以动手试试,希望对大家有所帮助!
细胞实验外包 想了解更多请关注:https://www.do-gene.cn

