造模机制：骨肉瘤是较为常见的原发性恶性骨肿瘤,利用显微外科技术将人成骨肉瘤裸鼠间传代的组织块植人胫骨,致局部肿瘤快速生长,侵袭周围组织。可自发地转移到肺，循环筛选肺转移灶。一般在术后2周左右,能见肿瘤结节状突出,随着转移瘤在体内传代，胫骨肿瘤体积增长保持相对稳定。随着转移灶瘤细胞在体内的传代,发生转移的肺表面可现见大小不等灰白色半透明状的瘤结节。肺转移率较高,并能稳定在80%左右。且具实验周期短、肺转移率高,以及与临床条件相似等特点。

造模方法：先行对裸鼠进行麻醉,复苏自发性高肺转移模型细胞株,传代培养5天后，用胰酶与EDTA混合液消化,每只裸鼠无菌条件下注射于裸鼠臀部皮下,待肿瘤生长以后，取对数生长期的原代移植瘤,挑选毛细血管丰富的瘤体,去除坏死的瘤组织,剪成0.5mm大小,加适量无菌的PBS 备用,麻醉受体动物,酒精消毒做下肢、膝上横切口,向远端牵拉皮游，暴露腔骨结节。以刀片向远端削起0.5mmx0.5mm大小骨皮质瓣,掀起60°~70后,植人一块瘤组织。骨瓣复位,无创缝线缝合筋膜,皮肤、整个过程在无菌净化室内操作。待裸鼠发生肺转移时,将部分肉眼可见转移灶癌组织取出,皮下扩增后再次原位移植。

模型特点：胫骨内生长的肿瘤与来源组织结构相似。肉眼观察切面为淡红色,鱼肉状,间质少,中心有液化坏死;镜检移植瘤细胞核大小不等,异型性明显,肿瘤向骺端生长,偶见穿破皮质,侵入周围软组织;放射线检查具有与人成骨肉瘤相似的特征,骨内呈溶骨性破坏,边界不清,皮质变薄,并有不同程度膨胀,可穿过骨皮质向周围软组织侵袭。

应用范围：该模型可用于研究肿瘤的生物学特性,阐明骨肉瘤的发病机制和肺转移的特性,探讨抗癌药物的作用机制并对其进行筛选。

模型评估：利用原位移植的方法构建的模型能稳定高效的发生肺转移,并且与人成骨肉瘤有相似的特征。

注意事项：用人成骨肉瘤细胞传代移植瘤组织作为移植材料,进行胫骨原位移植会发现胫骨原位移植的潜伏期较短,生长快,而皮下移植瘤呈局限性膨胀性生长,有不完整的纤维包膜,一般不发生肺转移,而胫骨原位移植瘤浸润基层,无纤维包膜,且能发生肺转移,7周后能发现动物有明显的消瘦。胫骨移植瘤能稳定高效的发生肺转移,是造模所采用的最有效的方法。

文章关键词：动物实验外包   想了解更多请关注：http://www.do-gene.cn/