在生物学领域中，细胞实验是一种常见的实验手段。而在细胞实验中，统计结果也是非常重要的一个环节。本文将介绍在细胞edu实验中如何进行结果统计。

我们需要了解什么是edu实验。Edu（5-ethynyl-2’-deoxyuridine）是一种DNA合成前体，可以被细胞摄取并转化成为DNA分子的一部分。因此，在进行edu实验时，我们可以通过使用荧光染料来检测出哪些细胞摄取了Edu，并进而计算出摄取率。

那么，在具体操作时应该如何进行结果统计呢？以下是详细步骤：

1. 制作荧光标记液

制作荧光标记液需要准备以下材料：

Edu：按照说明书加入适量的无菌PBS溶解后制成1 mM Edu溶液

Alexa Fluor 488 azide（或其他需要的染料）：将其加入DMSO中制成100 mM储存溶液

CuSO4：按照说明书加入适量的无菌PBS溶解后制成10 mM CuSO4溶液

无菌PBS缓冲液

具体的制作方法可以参考以下步骤：

将CuSO4加入无菌PBS中，使其浓度达到10 mM，制成CuSO4溶液。

将Edu按照说明书加入无菌PBS中，使其浓度达到1 mM，制成Edu溶液。

将100 mM Alexa Fluor 488 azide（或其他需要的染料）加入DMSO中，制成存储溶液。

将Edu和Alexa Fluor 488 azide混合，并在其中滴加一小滴CuSO4溶液。注意：不要让荧光标记液暴露在光线下。

2. 细胞处理

在进行细胞处理前，我们需要准备以下材料：

培养基（DMEM/F12+10% FBS）

Edu荧光标记液

DMSO：用于提取细胞内的染色体DNA

PBS缓冲液：用于洗涤细胞和离心细胞

具体操作步骤如下：

将需要进行实验的细胞分配在6孔板中，每孔加入1 mL培养基。

将Edu荧光标记液按照比例加入培养基中，使其浓度达到10 μM。

将细胞培养至70%～80%的密度后，用PBS缓冲液洗涤细胞一次。

将刚制好的Edu荧光标记液加入细胞培养基中，使其浓度达到10 μM，并继续培养24 h。

将培养基从6孔板中抽取出来并离心收集下来。注意：不要让荧光标记液暴露在光线下。离心后，倒掉上清液，留下底物。

用PBS缓冲液洗涤底物1次，并再次收集下来。

用DMSO溶解底物，并过滤掉其中的小颗粒。

3. 统计结果

在完成以上步骤后，我们就可以进行结果统计了。具体操作如下：

将处理好的细胞移植到载玻片上并固定

使用荧光显微镜观察样品，并拍摄照片

利用图像处理软件，将Edu阳性细胞数目与总细胞数目进行计算，得出Edu阳性细胞占总细胞数的比例

在进行结果统计时，需要注意以下几点：

在拍摄照片时，应该使用相同条件下的荧光显微镜，避免不同条件下的影响。

在计算比例时，应该进行多次实验并取平均值，以提高结果的可靠性。

荧光标记液应该在制备后尽快使用，并保存在避光、冷藏条件下。

通过以上步骤，我们可以完成edu实验中的结果统计。这种方法可以非常准确地测量出细胞内Edu含量，并进而计算出摄取率。当然，在进行操作时也需要严格按照操作流程来进行。希望本文能够为大家带来一些参考价值。

文章出自：生物实验外包    想了解更多请关注：http://www.do-gene.cn/