直接免疫荧光和间接免疫荧光染色方法的异同

1、组织用4%多聚甲醛固定6-8小时，转至20%蔗糖搜尘溶液至组织沉底。

2、冰冻切片8-10μm，推荐瑞沃德冷冻切片机，温度稳定，切片质量高。室温放置30分钟以上防脱片，-20℃保存。从冰箱拿出的冰冻切片在室温放置30分钟以上再进行免疫荧光。

3、1xPBS洗3次，每次3-5分钟。

4、用2%BSA室温或37℃封闭1小时。

5、一抗4℃孵育过夜。1xPBS洗3次，兆含每次3-5分钟。

6、二抗室温或37℃，避光孵育1小时。1xPBS洗3次，每次世猜禅3-5分钟。

7、DAPI染色。1xPBS洗3次，每次3-5分钟。

8、滴加防淬灭剂，封片。

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