尼氏染色法操作步骤：

1.固定：可采用乙醇、Carnoy固定液或中性福尔马林溶液。

2.组织切片：石蜡切片7~10μm或25μm(见注意事项4)。

3.切片脱蜡入水。

4.用甲基紫染色液涂片，染色10~20min。

5.蒸馏水冲洗。

6.用NisslDifferentiation分化4~8s，直到大部分染色被消除。

7.直接经无水乙醇至二甲苯，显微镜下观察。

8.如果有必要，重复步骤6和7。重复时，给予少量NissolDifferentiation分化。

9.在二甲苯中充分冲洗。加拿大香脂或DPX封片。

尼氏染色法注意事项：

1.尼氏体离体后容易溶解，所以组织取出后应立即固定，否则难以着色。

2.组织固定起着非常重要的作用，固定可采用乙醇、Carnoy固定液或中性福尔马林溶液。

3.本染色液对石蜡组织切片的尼氏染色效果较好。

4.如果要证实尼氏物质的存在，那么染色后必须要用NissolDifferentiation分化。

5.石蜡切片厚度7～10μm或25μm(皮质神经元密度的评估要用25μm厚的切片)。

6.染色后的标本务必避光保存，否则容易褪色。

7.主要由甲基紫染色液、分化液等组成。尼氏物质呈紫黑蓝色,神经元呈淡紫蓝色,细胞核呈紫蓝色。

文章发布于：细胞实验外包    想了解更多请关注：http://www.do-gene.cn