众所周知，WB是一种用于检测蛋白质表达水平的技术。它通过电泳将蛋白质分离，然后将其转移到膜上，利用特异性抗体检测目标蛋白质，WB可以提供关于蛋白质大小、表达量以及修饰状态等信息。

而实时荧光定量pcr（qpcr）技术，则是用于检测基因转录水平的，它通过扩增特定的 DNA 片段，并实时监测荧光信号的变化，来确定目标基因的表达量。qpcr具有高灵敏度、高特异性和定量准确等优点。

这实时荧光定量pcr和WB实验我们经常要做，但是吧，由于实验器材或者是经验不够，实验进展的不是很顺利，往往我们得不出自己想要的结果，这时候选择一家可靠的实验外包公司尤为重要，南京东极生物就是一个不错的选择。qpcr和WB实验外包公司 南京东极生物不仅拥有专业实验室，更是配置了丰富经验的实验员

好，回归正题，WB和 qpcr结果不一致，这究竟是怎么回事呢？

按照南京东极生物的经验，出现不一致的情况，大都是由于以下几个原因造成的：

1、抗体特异性，WB实验中使用的抗体可能存在特异性问题。如果抗体与非目标蛋白质发生交叉反应，或者对目标蛋白质的亲和力不一致，就可能导致错误的结果。

2、实验操作产生的误差，例如，在qpcr实验中，加样误差、pcr循环条件的不一致等都可能影响结果的准确性。

3、细胞类型和状态有问题，不同的细胞类型或细胞在不同的生理状态下，可能会表现出不同的基因表达和蛋白质表达模式。例如，某些细胞可能在特定条件下高表达某种蛋白质，但基因转录水平却没有明显变化。

当然还有其他可能，这只是其中3种常犯的，大家可以多自查下！

WB和qpcr结果不一致，那怎么调整解决呢？

这几个建议大家也可以参考下：

1、如果qpcr和WB实验中使用的是不同批次或不同来源的样本，那么它们之间存在的内在差异也会造成结果的不一致性。实验条件的不同，例如细胞培养条件、刺激因子的存在与否等，都会对最终的结果产生影响。东极生物建议大家尽量选择同一来源、同一处理条件的样本进行实验；

2、设置合适的阳性对照和阴性对照，进行验证；亦或者使用不同的技术验证，还可以采用免疫荧光、酶联免疫吸附测定（ELISA）等方法来验证蛋白质表达水平；

3、我们提醒，一定要进行多实验，减少实验误差；

总之，面对qpcr和WB结果不一致的问题，不要慌，仔细检查实验流程中的每一个环节

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