1. 查阅大量文献

目的：了解当前研究的最新进展，避免重复已有研究，寻找新的研究角度。

方法：广泛阅读相关领域文献，特别是综述文章，了解研究背景、研究方法、已解决的问题和未解决的问题。

结果：确定研究的新颖性和可行性，为实验设计提供理论基础。

2. 初步制定实验方案

目的：确保实验的顺利进行，根据实验室条件制定可行的实验方案。

内容：确定造模方案，给药途径，药物剂量，实验人员，所需仪器和试剂等。

结果：形成详细的实验方案，包括实验步骤、预期结果和可能的干扰因素。

实验准备和开展

1. 实验前的准备阶段

① 充分了解实验动物的特性

目的：确保实验环境对动物的影响最小化，提高实验结果的准确性。

内容：了解动物的习性、对环境变化的敏感性等，如小鼠胆小易惊，需要保持安静的实验环境。

结果：为实验环境的布置提供依据。

② 严格的动物饲养环境控制

目的：保持动物健康，确保实验结果的可靠性。

内容：控制温度、湿度、光照等条件，如豚鼠适宜的温度在18-20℃，湿度在40%-70%。

结果：提供适宜的动物饲养环境。

③ 完善的实验方案设计

目的：明确实验目的、方法、步骤和预期结果。

内容：包括实验动物的选择、分组、给药方式、观察指标等。

结果：形成详细的实验方案，为正式实验提供指导。

2. 实验过程中的注意事项

① 熟练的操作技巧

目的：减少动物的痛苦和实验误差。

内容：如给大鼠进行腹腔注射时，准确找到注射部位，避免损伤内脏。

结果：提高实验操作的准确性和效率。

② 密切观察动物的反应

目的：及时发现并处理异常情况，确保实验安全。

内容：观察动物的行为、生理状态的变化，如呼吸频率、心跳等。

结果：及时调整实验条件或终止实验，防止意外发生。

③ 数据的准确记录

目的：为实验结果的分析提供可靠的数据支持。

内容：记录实验过程中的所有数据，如时间、剂量、反应等。

结果：形成完整的实验记录，为数据分析提供依据。

3. 实验后的处理阶段

① 动物的妥善安置

目的：确保动物的福利和伦理要求。

内容：对完成实验且健康的动物提供适宜的环境继续饲养，对无法生存的动物进行人道安乐死。

结果：符合动物福利和伦理要求。

② 实验废弃物的处理

目的：防止污染环境和传播疾病。

内容：严格按照规定处理实验过程中产生的废弃物，如动物尸体、用过的注射器等。

结果：保护环境安全，防止疾病传播。

案例分享-探究某种药物对小鼠免疫功能的调节作用

1. 实验目的

明确评估并量化某种新药对小鼠免疫功能的调节作用，包括其对免疫系统不同组分（如白细胞数量、免疫球蛋白水平）的潜在影响。

2. 实验材料与设备

① 实验动物：健康成年Balb/c小鼠60只，体重范围18-22g，雌雄各半，确保无特定病原体（SPF）状态。

② 实验药品：待研究新药（A药），粉末状，纯度≥98%。

阳性对照药物（B药，已知具有免疫增强作用），粉末状，纯度≥95%。生理盐水，用于配制药物溶液及作为对照组给药。

③ 实验器材：灌胃针与注射器、电子天平、离心机、酶标仪、血细胞计数板、微量移液器、ELISA试剂盒（用于检测IgA、IgG、IgM）、无菌操作台。

3. 实验方法

① 动物分组与标记：将60只小鼠随机分为三组，每组20只，雌雄比例保持1:1。

组别设定：对照组（C组）、低剂量药物组（L组，5mg/kg体重）、高剂量药物组（H组，10mg/kg体重）。

使用耳标或尾巴标记进行个体识别。

② 给药处理：对照组每天灌胃生理盐水0.2ml/10g体重。L组和H组分别按5mg/kg和10mg/kg体重剂量灌胃A药溶液。

③ 给药时间：每日上午固定时间，连续14天。

④ 指标检测：

体重及脏器指数：在给药前（D0）和给药结束后（D14）称量小鼠体重，并解剖获取脾脏、胸腺等脏器，计算脏器指数（脏器重量/体重×100%）。

外周血白细胞计数：D14时，通过眼眶后静脉丛采血，使用血细胞计数板测定白细胞总数。

血清免疫球蛋白测定：分离血清，采用ELISA法测定IgA、IgG、IgM含量，严格按照试剂盒说明书操作。

⑤ 额外观察：记录小鼠行为变化、饮食饮水情况及死亡情况，作为药物安全性评估的参考。

4. 实验数据处理与分析

① 数据收集：详细记录所有实验数据，包括体重、脏器重量、白细胞计数及免疫球蛋白浓度等。

② 统计分析：使用SPSS或GraphPad Prism等统计软件对数据进行处理。进行单因素方差分析（ANOVA）比较各组之间的差异，采用Tukey's HSD或Dunnett's T3进行事后检验（根据数据分布选择）。评估药物剂量效应关系，使用线性回归或非线性拟合模型。

③ 结果解释：根据统计结果，分析药物对小鼠免疫功能的具体影响，包括增强或抑制效应，以及可能的剂量依赖性。

实验外包    想了解更多请关注：http://www.do-gene.cn