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如何看懂文献里那些图——ELISA
时间:2025-03-11 07:46:31点击量:61次


ELISA(酶联免疫吸附试验)是一种免疫测定方法,通常用于量化样品中特定目标分子的含量水平。常规用于ELISA的样本包括血清、血浆、细胞培养上清液、细胞裂解液、唾液、组织裂解液、尿液和其他液体生物样本。

酶联免疫吸附试验通常在96孔微孔板中进行,微孔板上包被有对相关分析物的特异性捕获抗体。在与实验样品、标准品或对照品孵化时,目标分析物被该抗体捕获,一个共轭的检测抗体与目标分析物上的未被捕获抗体结合占据其他表位结合。随后加入底物溶液,产生一个与固相分析物结合复合物含量成比例的信号。

常用的酶联免疫吸附试验

双抗体夹心法

检测大分子抗原最常用的方法。


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间接法

检测抗体最常用的方法, 主要用于对病原体抗体的检测。


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竞争法

检测小分子半抗原(药物、激素等)。


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实验做完后通过酶标仪测出对应的OD,建立标准曲线计算样本的浓度。

OD全称optical density,也就是光密度,也可以称为吸光度。吸光度指的是利用物质特有的吸收光谱,来鉴别物质或者测定物质的含量,也就是将一束特定波长的光通过被检测物,被检测物可以将光吸收掉一部分,通过吸光度计算被检测物的浓度。一般被检测物浓度越高,吸光度的值就会越高。

通过ELISA实验我们得到的是一个个的样本浓度的数值,所以说文章中涉及到的ELISA结果图一般就是对这些数据的统计分析,如:


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当然有的也是直接使用测得的OD值做统计分析,如:


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通过统计分析我们可以得到因不同实验条件得到的不同组蛋白量的差异是否有统计学意义,从而得到我们需要的结论。

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